蛋白質(zhì)組學(xué)可以利用蛋白微數(shù)列、電泳和質(zhì)譜分析法檢測、識別和特征標(biāo)記的蛋白進行分析。這些方法有其獨特的優(yōu)點和局限性,根據(jù)各自能力評估蛋白質(zhì)組譜。
細胞裂解成分一般使用的是表面活性劑,常用的有曲拉通X-100(Triton X-100)、脫氧膽(deoxycholate)、乙基苯基聚乙二醇(Nonidet P40,NP-40)、十二烷基磺酸鈉(SDS)。其中Triton X-100和NP-40為非離子型,deoxycholate和SDS為離子型。不同裂解成分的裂解強度不同,一般來說Triton X-100和SDS的裂解能力較強,deoxycholate和NP-40的裂解效果較為溫和,可以根據(jù)不同的實驗需求選用不同的裂解液。
標(biāo)準品的制備是非常復(fù)雜的問題,也是標(biāo)記免疫分析中比較難于制備的一個成分。以下討論的是實驗室標(biāo)準品(或商品化試劑中標(biāo)準品)的制備。
標(biāo)準品是標(biāo)記免疫分析定量的依據(jù)。標(biāo)準品的正確與否直接影響樣品的測定結(jié)果。如果在連續(xù)測定中,或各實驗室之間使用的標(biāo)準品不一致,則可影響到實驗結(jié)果的可比性。為此,對標(biāo)記免疫分析所使用的標(biāo)準品應(yīng)滿足如下要求。
一般情況下,化學(xué)試劑的保質(zhì)期為1-2年,有些性質(zhì)穩(wěn)定的保存期就長點,這取決于正確的保存方法。這就需要考慮存儲條件是否符合說明書上的要求,例如溫度、光照和濕度等,對于那些沒有明確存儲條件的試劑,更要注意存儲條件,通常高溫、暴曬和高濕度,非常容易造成產(chǎn)品的失效。