pH值,亦稱氫離子濃度指數(shù)、酸堿值,是溶液中氫離子活度的一種標(biāo)度,也就是通常意義上溶液酸堿程度的衡量標(biāo)準(zhǔn)。這個(gè)概念是1909年由丹麥生物化學(xué)家S?ren Peter Lauritz S?rensen提出。p代表德語(yǔ)Potenz,意思是力量或濃度,H代表氫離子(H)。有時(shí)候pH也被寫為拉丁文形式的pondus hydrogenii。
培養(yǎng)基與菌種分離是從含有多種微生物的樣品中獲得純種微生物的操作技術(shù)。菌種分離主要在培養(yǎng)皿上進(jìn)行,常用的方法是稀釋法和劃線法。使用這兩種方法的目的是是微生物的一個(gè)個(gè)體通過(guò)繁殖,在固體培養(yǎng)基上長(zhǎng)出肉眼能見(jiàn)的群體,根據(jù)培養(yǎng)特征,用接種針調(diào)取所需菌種并在顯微鏡下檢查,證明為單一形狀的菌體。常用的培養(yǎng)基是選擇培養(yǎng)基。
核酸在細(xì)胞中總是與各種蛋白質(zhì)結(jié)合在一起的。核酸的分離主要是指將核酸與蛋白質(zhì)、多糖、脂肪等生物大分子物質(zhì)分開(kāi)。
抽提方法的優(yōu)化?;诒椒拥姆椒ǖ淖畲髥?wèn)題是分層不徹底和部分 RNA 的丟失(不能全部將上清取出)。分層不徹底是因?yàn)楹怂岷偷鞍踪|(zhì)含量高,可以用增加裂解液使用量或者降低樣品量解決。脂肪組織要增加一步氯仿抽提。RNA 的丟失可以用反抽方法或者去除有機(jī)層后再離心的方法降低。基于柱離心式方法的最大問(wèn)題是樣品過(guò)量。
B淋巴細(xì)胞在抗原的刺激下,能夠分化、增殖形成具有針對(duì)這種抗原分泌特異性抗體的能力、B細(xì)胞的這種能力和量是有限的,不可能持續(xù)分化增殖下去,因此產(chǎn)生免疫球蛋白的能力也是極其微小的、將這種B細(xì)胞與非分泌型的骨髓瘤細(xì)胞融合形成雜交瘤細(xì)胞,再進(jìn)一步克隆化,這種克隆化的雜交瘤細(xì)胞是既具有瘤的無(wú)限生長(zhǎng)的能力,又具有產(chǎn)生特異性抗體的B淋巴細(xì)胞的能力,將這種克隆化的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)或注入小鼠體內(nèi)即可獲得大量的高效價(jià)、單一的特異性抗體.這種技術(shù)即稱為單克隆抗體技術(shù)。
微生物定性檢驗(yàn)的專屬性是指檢測(cè)樣品中可能存在的特定微生物種類的能力。當(dāng)替代方法以微生物生長(zhǎng)作為判斷微生物是否存在時(shí),其專屬性驗(yàn)證時(shí)應(yīng)確認(rèn)所用培養(yǎng)基的促生長(zhǎng)試驗(yàn),還應(yīng)考慮樣品的存在對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果的影響。當(dāng)替代方法不是以微生物生長(zhǎng)作為判斷指標(biāo)時(shí),其專屬性驗(yàn)證應(yīng)確認(rèn)檢測(cè)系統(tǒng)中的外來(lái)成分不得干擾試驗(yàn)而影響結(jié)果,如確認(rèn)樣品的存在不會(huì)對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果造成影響。采用替代方法進(jìn)行控制菌的檢驗(yàn),還應(yīng)選擇與控制菌具有類似特性的菌株作為驗(yàn)證對(duì)象。
鈉離子不參與細(xì)胞的組成,但仍是微生物發(fā)酵培養(yǎng)基的必要成分,鈉離子與維持細(xì)胞滲透壓有關(guān),故在培養(yǎng)基中常加入少量的鈉鹽,但用量不能過(guò)高,否則會(huì)影響微生物的生長(zhǎng)。
明膠是一種非常重要的天然生物高分子材料,是由動(dòng)物的皮骨及結(jié)締組織中的膠原部分降解成的。在食品、化妝品和制藥工業(yè)被廣泛使用。明膠一加熱即成為液體,遇冷則變成彈性固體凝膠塊。膠體的溶液-凝膠互相轉(zhuǎn)換是明膠特有的現(xiàn)象。因此,形成凝膠的能力是明膠一項(xiàng)很重要的性能。很早就有人試圖通過(guò)測(cè)算,用數(shù)字表示凝膠強(qiáng)度。
葉綠體色素是植物吸收太陽(yáng)光能進(jìn)行光合作用的重要物質(zhì),主要由葉綠素a、葉綠素b、胡蘿卜素和葉黃素組成。從植物葉片中提取和分離色素是對(duì)其認(rèn)識(shí)和了解的前提。利用葉綠體色素能溶于有機(jī)溶劑的特性,可用丙酮提取。分離色素的方法有多種,紙層析是其中最簡(jiǎn)便的一種。當(dāng)溶劑不斷地從層析濾紙上流過(guò)時(shí),由于混合物中各成分在兩相(即流動(dòng)相和固定相)間具有不同的分配系數(shù),它們的移動(dòng)速度不同,使樣品中的混合物得到分離。
凡鹽析所獲得的粗制蛋白質(zhì)(鹽析得到的IgG)中均含有硫酸銨等鹽類,這類將影響以后的純化,所以純化前均應(yīng)除去,此過(guò)程稱為“脫鹽”(desalthing)。脫鹽常用透析法和凝膠過(guò)濾法,這兩種方法各有利弊。前者的優(yōu)點(diǎn)是透析后析品終體積較小,但所需時(shí)間較長(zhǎng),且鹽不易除盡;凝膠過(guò)濾法則能將鹽除盡,所需時(shí)間也短,但其凝膠過(guò)濾后樣品體積較大。所以,要根據(jù)具體情況選擇使用。前實(shí)驗(yàn)中樣品體積較小,凝膠達(dá)濾后樣品體積不會(huì)太增加,所以選用凝膠過(guò)濾法。