分離質粒 DNA 與提取 RNA 或基因組 DNA 的提取方式是不相同的,因為必須質粒與基因組 DNA 必須分離。如果此刻,您加入離液劑將立即釋放所有物質,并且無法將小環(huán)狀 DNA 與高分子量染色體區(qū)別開來。因此,在質粒制備過程中中,直到裂解后才加入離液劑,鹽用于結合。
本實驗用簡易過碘酸鈉法進行HRP標記抗體。本法是以NaIO4先將HRP表面的糖分子氧化成醛基,然后再與Ig上的氨基相結合,所獲酶標記抗體的產率高,將近70%的HRP和Ig結合,99%的Ig與酶結合,酶與Ig的活性無重大損失,是目前最常用的方法。
當FITC在堿性溶液中與抗體蛋白反應時,主要是蛋白質上賴氨酸的r氨基與熒光素的硫碳胺鍵(thiocarbmide)結合,形成FITC-蛋白質結合物,即熒光抗體或熒光結合物。一個IgG分子中有86個賴氨酸殘基,一般zui多能結合15~20個,一個IgG分子可結合2~8個分子的FITC
熒光色素是最常用于標記抗體的標記物之一。熒光素經恰當?shù)募ぐl(fā)可發(fā)光,從而得知抗體的定位和待測抗原的分布情況,主要用于細胞分選或高分辨率免疫染色,是一種非常好的亞細胞水平精確定位的方法。
可溶于水的物質,容易成為水溶液流失。因此,回收時要加以注意。但是,對甲醇、乙醇及醋酸之類溶劑,能被細菌作用而易于分解。故對這類溶劑的稀溶液,經用大量水稀釋后,即可排放。
將培養(yǎng)基放到沸水浴中或采用其他有相同效果的方法(如高壓鍋中的蒸汽)融化。經過高壓滅菌的培養(yǎng)基盡量減少重新加熱的時間,避免過度加熱。培養(yǎng)基融化后立即移開,室溫靜置片刻(約2min),以免玻璃容器發(fā)生破裂。