蛋白質(zhì)溶液用透析除鹽時(shí),正負(fù)離子透過(guò)半透膜的速度不相同,如(NH4)2SO4中的?透析速度快,而透析過(guò)程中膜內(nèi)的?會(huì)生成H2SO4,使膜內(nèi)蛋白質(zhì)溶液呈酸性。因此,為避免蛋白質(zhì)變性,用鹽析法純化蛋白質(zhì)時(shí),開(kāi)始時(shí)應(yīng)用0.1mol/L的NH4OH透析。此外,為了保證蛋白質(zhì)在透析過(guò)程中不發(fā)生變性,可以將透析過(guò)程置于低溫下進(jìn)行。
降解問(wèn)題是RNA制備中常常到的問(wèn)題。因?yàn)樵?RNA 提取過(guò)程中,樣品儲(chǔ)存不當(dāng)或裂解效率低等情況都會(huì)導(dǎo)致降解。對(duì)于 DNA 提取,降解不是一個(gè)大問(wèn)題,因?yàn)閷?duì)于 PCR,DNA 可以被剪切并且工作正常,如果不希望有較多剪切的 DNA,可以使用弱裂解的方法。
PCR技術(shù)問(wèn)世于上世紀(jì)80年代。問(wèn)世之初的PCR體系比較大,動(dòng)輒以毫升計(jì)?,F(xiàn)在的PCR體系要精巧多了,總體積可大可小。我們常接觸到的常規(guī)PCR以及熒光定量PCR的體系一般都在幾十微升,小到可以10微升左右。
培養(yǎng)基既是提供細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)和促使細(xì)胞增殖的基礎(chǔ)物質(zhì),也是細(xì)胞生長(zhǎng)和繁殖的生存環(huán)境,培養(yǎng)基種類(lèi)很多。
DNA片段瓊脂糖凝膠電泳的原理與蛋白質(zhì)的電泳原理基本相同,DNA分子在高于其等電點(diǎn)的pH溶液中帶負(fù)電荷,在電場(chǎng)中向正極移動(dòng)。DNA分子在電場(chǎng)中通過(guò)介質(zhì)而泳動(dòng),除電荷效應(yīng)外,凝膠介質(zhì)還有分子篩效應(yīng),與分子大小及構(gòu)想有關(guān)。
不同熒光基團(tuán)的熒光強(qiáng)度是有高有低的,例如FAM就是一個(gè)熒光強(qiáng)度相對(duì)較高的基團(tuán),我們偏向于將其安排給相對(duì)表達(dá)量比較低的目的基因,而熒光強(qiáng)度相對(duì)較低的基團(tuán)可以用于檢測(cè)表達(dá)量比較高的如看家基因等,這樣會(huì)達(dá)到擴(kuò)增曲線平臺(tái)期接近的目的,結(jié)果會(huì)比較美觀。
RT-PCR一般情況下是指反轉(zhuǎn)錄PCR(reverse transcription),盡管有些資料上說(shuō)實(shí)時(shí)熒光定量PCR也(realtime fluores-cence quantitative PCR)也簡(jiǎn)稱(chēng)RT-PCR,但是這是不對(duì)的,不推薦。
本研究的目的在于展示Arium pro VF系統(tǒng)產(chǎn)生的超純水所具有的內(nèi)毒素含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于規(guī)定的限值,因而可用于上述各種應(yīng)用。
每種待測(cè)物都有一個(gè)可測(cè)定的濃度或活性規(guī)模,樣品成果若超越此規(guī)模,分析儀將顯示成果超越規(guī)模的提示。表明試劑現(xiàn)已變質(zhì),應(yīng)更換合格試劑。
菌種是用于發(fā)酵過(guò)程中作為活細(xì)胞催化劑的微生物,是指食用菌、工業(yè)菌、農(nóng)用菌菌絲體及其生長(zhǎng)基質(zhì)組成的繁殖材料,其中包括細(xì)菌、放線菌、酵母菌和霉菌四大類(lèi)。菌株是一種菌類(lèi)系列中一個(gè)品種,表示同種微生物不同來(lái)源的純種培養(yǎng),從自然界中分離得到的每一個(gè)微生物純培養(yǎng)都可稱(chēng)一個(gè)菌株。