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發(fā)布日期:2023/7/13 14:25:00

  今天遠慕生物來和大家總結(jié)一下生化試劑盒和elisa試劑盒的差異。其實最主要的還是兩者的原理問題。下面我們一起來看看吧!

 

  一、檢測原理:

  1、ELISA試劑盒檢測原理

  ELISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗技術(shù)。由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行,每加入一種試劑孵育后,可通過洗滌除去多余的游離反應(yīng)物,從而保證試驗結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。在實際應(yīng)用中,通過不同的設(shè)計,具體的方法步驟可有多種。即:用于檢測小分子抗原或半抗原的抗原競爭法(圖A)、用于檢測抗原的雙抗體夾心法等等。

  抗體的特異性產(chǎn)生是由于抗原決定簇決定,抗體產(chǎn)生的過程也比較復(fù)雜,特別是小分子抗原必須偶聯(lián)到載體蛋白上才能產(chǎn)生抗體。

  ELISA測定結(jié)果的表現(xiàn)形式:

  物質(zhì)濃度:單位主要是μg/mL。

  2、生化試劑盒檢測原理

  生化試劑盒檢測的本質(zhì)就是某物質(zhì)化學(xué)變化的顯色反應(yīng),其反應(yīng)過程可以劃分為四個區(qū):延遲區(qū)、等速區(qū)、過渡區(qū)和平衡區(qū),以時間為橫坐標(biāo)、吸光度為縱坐標(biāo)作圖。

  延遲區(qū):無規(guī)律可尋。

  等速區(qū):對應(yīng)的是速率法,一般應(yīng)用于酶活力的檢測。

  過渡區(qū):對應(yīng)的是固定時間法,目的是解決某些化學(xué)反應(yīng)的非特異性問題,提高準(zhǔn)確度。

  平衡區(qū):對應(yīng)的是終點法,主要是測定某物質(zhì)在樣本中的含量。

  目前,遠慕生物的生化試劑盒采用的原理為:可見區(qū)的顯色反應(yīng)和紫外區(qū)的某一物質(zhì)變化量。某物質(zhì)與顯色劑反應(yīng)后,形成區(qū)別于自身的顏色反應(yīng),在某一波長下,吸光度的強弱與物質(zhì)的含量呈正比關(guān)系。

  生化測定結(jié)果的表現(xiàn)形式:

 ?、?物質(zhì)濃度:單位主要是mg/L、mmol/L、μmol/mgprot等

 ?、?某種能力和活力:世界上沒有真實物質(zhì)存在,以另一真實存在的物質(zhì)變化量來表示其能力大小;其單位為U/L、U/gprot等。例如酶活的單位:在特定條件下,每分鐘內(nèi)轉(zhuǎn)化1 μmol底物的酶量為一個單位(U),或者轉(zhuǎn)化1 μmol的有關(guān)基團的酶量。

  二、從微觀角度來看

  某一物質(zhì)的抗原決定簇的活性位點(或者抗原抗體特異性結(jié)合位點),與化學(xué)反應(yīng)的活性位點可能存在差異。

  生化試劑盒和ELISA試劑盒的檢測結(jié)果趨勢是正相關(guān)、負相關(guān)還是不相關(guān)的問題,需要更高技術(shù)設(shè)備和方法,以及大量的實驗數(shù)據(jù)來驗證。從原理中也說明了ELISA試劑盒分種屬,而生化試劑盒不分種屬的問題。

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