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發(fā)布日期:2024/3/8 8:39:00

質(zhì)粒提取常見問題分析

1、影響質(zhì)粒提取的因素有哪些?

質(zhì)粒提取的得率和質(zhì)量與很多因素有關(guān),如宿主菌的種類和培養(yǎng)條件、細(xì)菌細(xì)胞的裂解、質(zhì)粒拷貝數(shù)、質(zhì)粒的穩(wěn)定性、抗生素、吸附膜的吸附能力、提取操作的熟練程度等等。

2、為什么從革蘭氏陽(yáng)性菌中提取質(zhì)粒要在懸浮液中加入溶菌酶?

革蘭氏陽(yáng)性菌有一層細(xì)胞壁,必須加入溶菌酶才能使之溶解。

3、如何根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要選擇不同級(jí)別的產(chǎn)品?

從純度上:各種常規(guī)操作,包括酶切、PCR、測(cè)序、文庫(kù)篩選、連接和轉(zhuǎn)化,普通純度的質(zhì)??梢詽M足要求;而對(duì)于轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn),則要求使用高純度質(zhì)粒提取試劑盒方能滿足要求。

從提取的量上:1-20μg,應(yīng)選擇小量提取試劑盒;20-40μg,應(yīng)選擇中量提取試劑盒;大于40μg,應(yīng)選擇大量提取試劑盒。

從宿主菌上:分為普通細(xì)菌質(zhì)粒提取試劑盒、G+菌質(zhì)粒提取試劑盒和酵母菌質(zhì)粒提取試劑盒,根據(jù)情況進(jìn)行選擇。
 

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