免疫印跡
Western blot
Western-blot,又稱免疫印跡,是將獲得的蛋白樣品通過(guò) SDS-PAGE 電泳,對(duì)不同分子量的蛋白進(jìn)行分離,并通過(guò)轉(zhuǎn)移電泳將凝膠上分離到的蛋白轉(zhuǎn)印至固相支持物(PVDF 膜)上,用抗靶蛋白的非標(biāo)記抗體(一抗)與轉(zhuǎn)印后膜上的靶蛋白進(jìn)行特異性結(jié)合,再與 HRP 標(biāo)記的二抗結(jié)合,經(jīng)過(guò)底物顯色或放射自顯影以檢測(cè)電泳分離的特異性目的基因表達(dá)的蛋白成分。
服務(wù)流程
1. 細(xì)胞/組織總蛋白提取
2. 蛋白定量(BCA 法)
3. SDS-PAGE 電泳
4. 蛋白轉(zhuǎn)移到 PVDF 膜
5. 膜封閉和一抗孵育
6. 酶標(biāo)記二抗孵育
7. ECL 顯色
8. X-射線膠片曝光
9. 顯影,定影
備注:請(qǐng)?zhí)峁┬迈r或正常保存的細(xì)胞/組織樣品
(250mg 組織塊或 107個(gè)細(xì)胞),干冰郵寄
提供結(jié)果
1. 目的蛋白和內(nèi)參的掃描圖
2. 各樣本的灰度值
3. 完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告
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